水中葉綠素a的測定方法

葉綠素是植物光合作用中的重要光合色素，通過測定浮游植物葉綠素，可掌握水體的初級生產力情況。浮游藻類里常見的葉綠素有a、b、c、d四種類型，其中，葉綠素a在一切浮游藻類里大約占有機物干質量的1%~2%，是環境監測中表征浮游植物生物量最常用的指標之一，所以常被用于研究地表水環境的富營養化。那水中葉綠素a含量一般是多少呢？水體富營養化一般采用的指標是：氮含量超過0.0.3 mg/L，磷含量大于0.01～0.02mg/L，BOD大于10mg/L，pH值7～9的淡水中細菌總數超過10萬個／毫升，葉綠素a含量大于10ug/L。

水質葉綠素a的測定方法有分光光度法、熒光光譜法、色譜法和遙感監測等方法，其中，分光光度法和熒光光譜法應用最為廣泛。下面小編來具體介紹一下。

1、分光光度法

分光光度法屬于光度法的一種，該分析方法采用的原理是物質分子對光具有選擇吸收的特性。葉綠素a的最大吸收峰位于663nm，在一定濃度范圍內，其吸光度與濃度符合朗伯-比爾定律，可根據吸光度-濃度之間的線性關系，計算葉綠素a的濃度。

2、熒光光譜法

葉綠素分子被紫外光照射后可發射出特征紅色熒光，其熒光強度與葉綠素濃度呈正比，據此可釆用熒光法進行葉綠素a的定量分析。普通萃取熒光法的操作步驟主要為標準溶液的配制、標準曲線的制定和樣品熒光強度的測定。將提取的新鮮綠色植物液中的葉綠素作為儲備液，用分光光度法標定其濃度：將標準儲備液稀釋配制成標準系列，用熒光光度計測定標準系列的熒光強度，繪制葉綠素a標準曲線；由樣品測得的熒光強度從葉綠素a標準曲線上查得相應濃度。

3、色譜法

高效液相色譜(HPLC)法是一種廣泛應用于化學、醫藥、生命科學等領域的分析手段。使用高效液相色譜法測定葉綠素a時，需要破壞測定藻類的原樣，前處理方法與分光光度法的前處理方法相似。

4、遙感監測

水質遙感監測是通過監測一定波長范圍內的水體輻射值，定量分析水體反射光譜特征與水質指標間的關系，進而構建水質指標反演算法的一類方法體系。遙感技術測定葉綠素a近年來已經被國內外許多學者證實具有監測范圍廣、速度快、成本低和便于進行長期動態監測的優勢。